Научные публикации

Опубликовано: 10.06.2019

В основе данного исследования лежало предположение, что обинутузамаб обладает цитотоксическим действием на NK-клетки. Целью данного исследования было изучить иммунный ответ после терапии обинутузумабом у больных хроническим лимфолейкозом (ХЛЛ). Для этого авторы проанализировали субпопуляции CD4+ и CD8+ T-клеток, B-клеток и NK-клеток периферической крови у 8 пациентов с ХЛЛ, кому проводилась монотерапия обинутузумабом. Субпопуляционный состав лимфоцитов был проанализирован до начала каждого курса терапии и через 24 и 72 часа после введения первой полной дозы в 1000 мг (курс 1 день 2). Также оценка производилась спустя 3 месяца после последнего введения препарата. Всего у каждого пациента было исследовано 10 образцов периферической крови. Анализ проводили с помощью метода проточной цитометрии с использованием моноклональных антител анти-CD3, анти-CD4, анти-CD8, анти-CD19 и анти-CD56+. После первого введения 1000 мг обинутузумаба (курс 1 день 2) было выявлено значимое снижение количества CD4+ и CD8+ T-клеток в периферической крови пациентов по сравнению с предшествующей терапией. В дальнейшем количество CD4+ Т-клеток оставалось редуцированным и после 6 курсов терапии обинутузумабом (1235 клеток/μl - базальный уровень, 662 клеток/μl - после 6 курсов терапии, p ≤ 0.05). Однако этого не наблюдалось при исследовании субпопуляции CD8+ Т-клеток (987 клеток/μl - базальный уровень, 837 клеток/μl - после 6 курсов терапии). Также, интересным явилось значимое снижение уровня NK-клеток как после первого введения препарата (490 клеток/μl - базальный уровень, 23 клеток/μl - после первого введения препарата, p ≤ 0.05), так и после 6 курсов терапии (490 клеток/μl - базальный уровень, 149 клеток/μl - после 6 курсов терапии, p ≤ 0.05). Таким образом, было показано, что терапия обинутузумабом вызывает деплецию NK-клеток у пациентов с ХЛЛ.

Опубликовано: 10.06.2019

В настоящее время стратификация рисков при Т-остром лимфобластном лейкозе (Т-ОЛЛ) основана на оценке минимальной резидуальной болезни (МРБ) методом ПЦР, а именно исследование клональной реаренжировки генов IgH/TCR. Однако до 10% пациентов не имеют молекулярной метки, подходящей для исследования методом ПЦР. В связи с этим в данном исследовании оценка рисков производилась на основании результатов МРБ-детекции методом многоцветной проточной цитометрии. В исследование включено 274 пациента с Т-ОЛЛ, терапия которым проводилась по протоколу NOPHO-ALL2008. Оценка МРБ проводилась с помощью метода 6-цветной проточной цитометрии и методом ПЦР в реальном времени. Для стратификации рисков использовали пороговое значение 10-3 для ПЦР на 29 день. На момент установки диагноза у 93% пациентов был выявлен маркер для дальнейшего отслеживания МРБ методом проточной цитометрии (МПЦ), у 84% - ПЦР-маркер, 99.3% - имели обе метки. Учитывая возраст пациентов и количество лейкоцитов, был определен коэффициент риска развития рецидива 3.55 (95% CI 1.4-9.0, p = 0.008) на 29 день для МПЦ-МРБ  ≥ 10-3 и 5.6 (95% CI 2.0-16, p = 0.001) для ПЦР-МРБ  ≥ 10-3 в сравнении с МРБ < 10-3. Те пациенты, которые были определены в группу промежуточного риска на 29 день с уровнем МРБ 10-4-<10-3, и те больные из группы промежуточного риска с МРБ < 10-4 или МРБ-негативностью имели сопоставимые результаты 5-летней бессобытийной выживаемости (БСВ), вне зависимости от того, какой метод МРБ-детекции был использован. У тех пациентов, у которых на 15 день уровень МРБ методом МПЦ был  < 10-4 , общая частота развития рецидивов составила 2.3% (95% CI 0-6.8, n = 59). Таким образом, исследование МРБ-статуса методом МПЦ позволяет своевременно выявить пациентов, которые могут быть в дальнейшем кандидатами на проведение им терапии сниженной интенсивности. Однако для подтверждения этого необходимо проведение дальнейших исследований. Результаты этого исследования, показали, что оценка МРБ методом МПЦ является надежным методом стратификации рисков при Т-ОЛЛ и может быть использована в случае отсутствия других маркеров для оценивания МРБ.

Опубликовано: 10.06.2019

В основе развития рефрактерности или рецидива диффузной В-крупноклеточной лимфомы (ДВККЛ) часто лежат активация субпопуляции В-подобных клеток (АВС), а также различные генетические нарушения, которые приводят к активации NF-κB сигнального пути, что, в свою очередь, замедляет терминальную дифференцировку В-клеток. Здесь авторы показали, что нарушение ДНК через ген р53 является главным механизмом, подавляющим патогенетическую связь между активацией гена IKK2ca NF-κB сигнального пути и сниженной дифференцировкой В-клеток в результате потери Blimp1 при лимфогенезе. Также, показано, что эти генетические изменения вместе с опухолевым микроокружением запускают молекулярные механизмы, такие как аберрантная коэкспрессия FOXP1 и AID, приводящие к прогрессии лимфомы, а также блокируют иммунный ответ путем даунрегуляции МНС II класса и апрегуляции PD-L1, и индуцируют Т-клеточное истощение. Вместе с тем, блокада PD-1 и анти-CD20-опосреднованная В-клеточная цитотоксичность приводит к Т-клеточной активации и реализации противоопухолевого ответа, что удлиняет выживаемость у мышей. Таким образом, результаты исследования показали патогенетическую взаимосвязь между активацией NF-κB сигнального пути, наличием генетической нестабильности и механизмом ухода опухоли от иммунного ответа через ингибирование контрольных точек при ДВККЛ, что в совокупности представляет собой доклиническое обоснование для применения иммунотерапии, в том числе с использованием PD-1/PD-L1-ингибиторов, у пациентов с АВС типом ДВККЛ.

Опубликовано: 02.06.2019

Известно, что моносомный кариотип у пациентов с острым миелоидным лейкозом (ОМЛ) ассоциирован с неблагоприятным прогнозом. Целью данного исследования было проанализировать влияние режимов индукционной химиотерапии и влияние выполнения трансплантации аллогенных гемопоэтических стволовых клеток (алло-ТГСК), в случае наличия родственного донора, на результаты выживаемости молодых взрослых больных ОМЛ с моносомным кариотипом. В первом исследовании пациенты были рандомизированы на индукционную химиотерапию с использованием даунорубицина, или митоксантрона, или идарубицина в сочетании со стандартными дозами цитарабина и этопозида. В другом исследовании пациенты были рандомизированы на терапию с использованием стандартных или высоких доз цитарабина в индукции ремиссии в сочетании с даунорубицином и этопозидом. В дальнейшем в обоих исследованиях в случае достижения ремиссии ОМЛ (в т.ч. и при неполном восстановлении кроветворения) пациентам выполняли алло-ТГСК, в случае наличия родственного донора, или трансплантацию аутологичных стволовых клеток (ауто-ТСКК), если у пациента не было донора. При сравнении результатов с пациентами из группы промежуточного прогноза (n=1584) и неблагоприятного прогноза (n=218), но без моносомного кариотипа, было показано, что пациенты с моносомным кариотипом (n=188) значимо реже достигают ремиссию заболевания (коэффициент вероятности=2.85, 95% доверительный интервал (95%, CI): 2.10-3.88), а также имеют худшую общую выживаемость (коэффициент рисков, (HR)=2.44, 95% CI: 2.08-2.88). Также было выявлено, что выбор антрациклинов и дозы цитарабина не влияют на результаты выживаемости пациентов с моносомным кариотипом. Выполнение алло-ТГСК от родственного HLA-идентичного донора позволяет значимо улучшить показатели выживаемости у пациентов с моносомным кариотипом, достигших ремиссии ОМЛ (HR=0.59, 95% CI: 0.37-0.95).

Опубликовано: 02.06.2019

Целью данного исследования было оценить влияние хронической реакции трансплантат-против-хозяина (хРТПХ) на результаты выживаемости пациентов с рецидивом острого лейкоза (ОЛ) после трансплантации аллогенных гемопоэтических стволовых клеток (алло-ТГСК), которым провели курс химиотерапии (ХТ) в сочетании с трансфузией лимфоцитов донора (ТЛД). Всего в исследование включено 104 пациента. 5-летняя общая частота достижения ремиссии ОЛ после ХТ+ТЛД составила 81% (95% CI, 73,3%-88,7%) у больных, у которых после ТЛД развилась хРТПХ средней степени тяжести и 84,6% (95% CI, 74,5%-94,7%) в случае хРТПХ тяжелой степени тяжести. Частота достижения ремиссий в группах пациентов с хРТПХ легкой степени и без хРТПХ была значимо ниже – 40,9% (95% CI, 29,3%-52,5%) и 29,2% (95% CI 23,1%-35,3%), соответственно. Показатели безрецидивной смертности (БРС) были сопоставимы у пациентов с и без хРТПХ. 5-летняя беспрогрессивная выживаемость (БПВ) после ХТ+ТЛД также достоверно отличалась в группах больных со средней и тяжелой формами хРТПХ (42,9% (95% CI, 26,2%-70,2%) и 34,6% (95% CI, 15,3%-78,2%), соответственно) и с легкой степенью хРТПХ или без нее (9,1% (95% CI, 2,4%-34,1%) и 8,3% (95% CI 3,3%-21,3%), соответственно). Такие же различия были получены и при анализе общей выживаемости (ОВ) в данных группах пациентов: 5-летняя ОВ при тяжелой хРТПХ после ХТ+ТЛД – 56,7% (95% CI, 38,9%-82,7%) и средней степени тяжести хРТПХ - 43,1% (95% CI, 22,1%-84%), в сравнении с пациентами с легкой формой хРТПХ – 9,1% (95% CI 1,8%-47,1%) и без хРТПХ – 14,9% (95% CI, 7,3%-30,2%). Таким образом, результаты этого исследования показали взаимосвязь между хРТПХ и развитием аллоиммунной реакции – реакции трансплантат-против-лейкоза (РТПЛ), у пациентов с рецидивом ОЛ после алло-ТГСК. Однако хРТПХ легкой степени тяжести, по всей видимости, не приводит к развитию достаточной РТПЛ, которая может обеспечить длительную ремиссию и, тем самым, не улучшает показатели выживаемости.

Опубликовано: 02.06.2019

Ранее была показана высокая эффективность терапии обинутузумабом (GA101) и ибрутинибом пациентов с хроническим лимфолейкозом (ХЛЛ). Доклинические исследования и доказанная безопасность терапии данными препаратами послужило основой для проведения исследований эффективности комбинированной терапии. Целью исследования CLL2-BIG явилось оценить эффективность последовательной комбинированной терапии с вышеуказанными препаратами. С целью уменьшения опухолевой нагрузки проводили 2 курса бендамустином и далее 6 курсов индукционной терапии ибрутинибом в сочетании с GA101. Далее проводили поддерживающую терапию с целью удержания МРБ-негативной ремиссии. Здесь представлены результаты на момент окончания индукционной терапии. Всего в анализ включено 61 пациент. 30 больным ранее специфического лечения не проводилось и 31 пациент был с рецидивом или рефрактерным течением ХЛЛ. Терапия бендамустином проведена 44 больным. Наиболее частными побочными явлениями на фоне проводимой индукционной терапии было развитие нейтропении (14,8%) и тромбоцитопении (13,1%). 1 пациент умер в результате тяжелого дуоденита. Общий ответ на терапии достиг 100%. У 54,1% пациентов удалось получить частичную ремиссию, у 41% - клинически полную ремиссию и 4,9% - полную ремиссию на фоне неполного восстановления показателей периферической крови (оценка статуса методом ПЭТ-КТ и пункция костного мозга не проводились согласно исследовательскому протоколу). 29 пациентов (47,5%) достигли МРБ-негативности (10-4), которая исследовалась методом проточной цитометрии. Таким образом, результаты этого исследования показали, что данный протокол лечения является высоко эффективным у пациентов с ХЛЛ.

Опубликовано: 02.06.2019

Трансплантация тимуса представляет собой перспективное направление, в виду возможного восстановления тимопоэза и пролиферации Т-клеток. Исследователи предположили, что тимус человека содержит самообновляющуюся субпопуляцию лимфоидных клеток-предшественников, которые обеспечивают пролиферацию Т-клеток в течение длительного времени. Исследование проведено на мышах с иммунодефицитом, которым трансплантировали ткань человеческого тимуса с экспрессией аутологичного белка GFP или аллогенные CD34+ клетки. Восстановление тимопоэза и дифференцировку и пролиферацию Т-клеток из клеток-предшественников изучали с помощью экспрессии GFP или HLА. В результате обе модели показали возможность длительного сохранения тимопоэза и пролиферации Т-клеток после трансплантации. У таких мышей человеческие тимические предшественники Т-клеток с фенотипом CD45RA+CD31+CD4+ являлись недавними эмигрантами из тимуса, которые определялись в периферической крови в раннем периоде после трансплантации (в течение 32 недель). Таким образом, результаты исследования показали, что тимус человека содержит долгоживущие лимфоидные клетки-предшественники, которые обеспечивают тимопоэз и пролиферацию Т-клеток в течение длительного времени.

Опубликовано: 02.06.2019

Кроветворные ниши костного мозга представляют собой довольно динамичные структуры. В них гемопоэтические стволовые и клетки предшественники находятся в состоянии покоя в течение длительного времени. Кроме того, гемопоэтические ниши способствуют пролиферации и дифференцировке стволовых клеток и клеток-предшественников в ответ на изменяющиеся физиологические условия или в ответ на стимуляцию различных внешних агентов. Такая динамичность и быстрая реактивность в ответ на внешние и внутренние стимулы характерна и врожденной иммунной системе. Так, сегодня известно, что иммунные клетки, реализующие врожденный иммунный ответ - макрофаги и нейтрофилы, являются регуляторами кроветворных ниш и, в том числе, стволовых гемопоэтических клеток, из которых они сами и произошли. Данный обзор освещает современные представления о функционировании костномозговых кроветворных ниш и их регуляции посредством иммунных клеток, в частности нейтрофилов. Здесь показано, что нейтрофилы обладают уникальными свойствами, среди которых трофическая, циркадная и миграционная функции, что лежит в основе их способности оказывать регуляторное влияние на гемопоэтические ниши.

Опубликовано: 27.05.2019

Ежегодно в США множественной миеломой (ММ) заболевает около 30000 человек. Медиана 5-летней выживаемости составляет 82, 62 и 40% для пациентов с I, II и III стадией, соответственно. С течением времени появляются новые диагностические методы, а также меняются терапевтические подходы в лечение пациентов с ММ. Одним из перспективных напрвлений является использование антигена созревания В-клеток (ВСМА; известный также как TNFRSF17 – белок из семейства факторов некроза опухоли), который экспрессируется на опухолевых клетках. Результаты доклинических испытаний показали, что использование анти-ВСМА моноклональных антител может быть достаточно эффективным у больных ММ. Кроме того, отмечено, что лечение данными препаратами является хорошо переносимым. В настоящее время проводятся многочисленные клинические исследования по изучению эффективности данного лечения у пациентов с ММ.

Опубликовано: 27.05.2019

Гемофилия А является редким гематологическим заболеванием, характеризующимся отсутствием VIII фактора свертывания. Проведение заместительной терапии в 30% случаев приводит к развитию ингибиторной формы. В такой ситуации единственным способом «уничтожения ингибитора» является индукция толерантности путем ежедневного введения больших доз фактора VIII. Однако данный подход эффективен лишь у 60-80% пациентов. В данной работе на мышах с тяжелой формой гемофилии А изучали возможность блокирования передачи сигнала через В-клеточный рецептор путем ингибирования Брутоновской тирозинкиназы с целью подавления иммунного ответа против фактора VIII. Мышам с дефицитом фактора VIII, как с истинным, так и с иммуноопосредованным, вводили ингибитор тирозинкиназы Брутона (R) - 5-амино-1-(1-цианопиперидин-3-Ил)-3-(4-[2,4-дифторфеноксил] фенил) - 1Н пиразол-4-карбоксамид (PF-06250112) с целью ингибирования передачи сигнала через В-клеточный рецептор в ответ на введение экзогенного фактора VIII. Результаты исследования показали, что ингибирование Брутоновской тирозинкиназы во время реализации иммунного ответа против фактора VIII у мышей с истинным дефицитом фактора VIII не препятствует формированию ингибиторной формы гемофилии А. И наоборот, у мышей, ранее сенсибилизированных к фактору VIII, введение ингибитора тирозинкиназы Брутона препятствовало реализации В-клеточного иммунного ответа против фактора VIII. Кроме того, ингибиторы тирозинкиназы Брутона подавляли дифференцировку В-клеток памяти как ex vivo, так и in vivo. Таким образом, данное исследование показало, что использование ингибиторов тирозинкиназы Брутона (PF-06250112) является эффективным методом при ингибиторной форме гемофилии А, в основе которого лежит подавление реактивации В-клеток памяти, специфичных к фактору VIII, в ответ на повторные введения экзогенного фактора VIII.